方法学评价

　　要点20：

　　血涂片制备：手工推片法用血量少、操作简单，是应用最广泛的方法。此外，疟原虫、微丝蚴等检查可采用厚血膜涂片法。

　　瑞氏染色法是最经典、最常用的染色法，尤其对于细胞质成分、中性颗粒等可获得很好的染色效果，但对细胞核的着色能力略差。吉姆萨染液对细胞核、寄生虫(如疟原虫等)着色较好，结构更清晰，但对细胞质成分的着色能力略差。采用瑞氏-吉姆萨复合染液可使细胞胞质、颗粒、胞核等均获得满意的染色效果。

　　瑞氏染料的质量规格用吸光度比值(rA)来评价，rA测定方法：取瑞氏染液15～25μl，加甲醇10ml稀释，混匀，以甲醇为空白管，分别在波长650nm(美蓝吸收峰波长)、525nm(伊红吸收峰波长)测定吸光度(rA=A650/A525)。新配制染料rA接近2，随美蓝逐渐氧化为天青B(其吸收峰为650nm，吸光度约为美蓝一半)，rA也下降，降到1.3±0.1时，染料即可使用。新鲜配制的染料偏碱，须在室温或是37℃下贮存一定时间，待美蓝逐渐变为天青B，贮存时间愈久，染色效果愈好。在贮存过程中，必须加塞，以防甲醇挥发(如加甘油)和氧化成甲酸，所用甲醇须为AR级，若其中含过多丙酮，会使染色偏酸，白细胞着色不良。