红细胞计数

　　要点：

　　手工法 误差原因为：①样本：血液发生凝固。②操作：稀释、充池、计数不规范。③器材：微量吸管、计数板不标准。④固有误差(计数域误差)。

　　要点：

　　血液分析仪法 是常用方法，比手工法精确(如电阻抗计数法的变异系数为2%，手工法则大于11%)，且操作简便、快速。当白细胞数量明显增高时，会干扰红细胞计数和体积测定而产生误差。

　　要点：

　　参考值：成年男性(4～5.5)×1012/L;成年女性(3.5～5.0)×1012/L;新生儿(6.0～7.0)×1012/L。

　　医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采取治疗措施;低于参考值低限，为诊断贫血界限，应寻找病因;低于1.5×1012/L应考虑输血。

　　要点：生理性变化

　　(1)年龄与性别的差异：新生儿，由于出生前处于生理性缺氧状态，故红细胞明显增高，较成人约增加35%，出生2周后逐渐下降，2个月婴儿约减少30%。男性在6～7岁时最低，随年龄增大而逐渐上升，25～30岁达到高峰，30岁后随年龄增大而逐渐下降，直到60岁尚未停止。女性也随年龄增大而逐渐上升，13～15岁达到高峰，随后受月经、内分泌等因素影响而逐渐下降，21～35岁维持最低水平，以后随年龄增大而逐渐上升，与男性水平相当。

　　(2)精神因素：感情冲动、兴奋、恐惧、冷水浴等可使肾上腺素增多，导致红细胞暂时增多。

　　(3)剧烈体力运动和劳动：由于需氧量增加，使红细胞生成素生成增加、骨髓加速释放红细胞，导致红细胞增多。

　　(4)气压减低：高山地区居民和登山运动员因缺氧，红细胞代偿性增生，数量增高。

　　(5)妊娠中后期：为适应胎盘循环需要，通过神经、体液调节，孕妇血浆容量明显增加使血液稀释，导致红细胞减少。

　　要点：

　　按病因将贫血分成：

　　(1)急、慢性红细胞丢失过多：各种原因出血，如消化性溃疡、痔疮、十二指肠钩虫病等。

　　(2)红细胞寿命缩短：各种原因溶血，如输血溶血反应、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症等。

　　(3)造血原料不足：如慢性失血者，因铁重新利用率减少、铁供应或吸收不足所致;先天性或后天性红细胞酶缺陷者，因铁不能被利用、堆积在细胞内外所致，如铁粒幼细胞贫血;某些药物，如异烟肼、硫唑嘌呤等;继发于某些疾病，如类风湿关节炎、白血病、甲状腺功能亢进、慢性肾功能不全、铅中毒等。

　　(4)骨髓造血功能减退：某些药物，如抗肿瘤药物、磺胺类药物、保泰松、有机砷、马利兰等可抑制骨髓造血功能;物理因素，如X线、60钴、镭照射等可抑制骨髓造血功能;继发于其他疾病，如慢性肾功能衰竭;原发性再生障碍性贫血。

　　要点：红细胞增多

　　(1)原发性红细胞增多：如真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症等。

　　(2)继发性红细胞增多：如房室间隔缺损、法洛四联症等各种先天性心血管疾病，肺气肿、肺源性心脏病、肺纤维化、矽肺和各种引起肺气体交换面积减少的疾病，异常血红蛋白病，肾上腺皮质功能亢进(库欣病)，某些药物如肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。

　　(3)相对性红细胞增多：如呕吐、严重腹泻、多汗、多尿、大面积烧伤、晚期消化道肿瘤而长期不能进食等。

　　要点：

　　红细胞计数操作方法

　　改良牛鲍计数板(血细胞计数板)：计数池内划有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大格，每个大格面积为1.0mm2，容积为0.1mm3(μl)。其中，中央大方格用双线分成25个中方格，位于正中及四角的5个中方格是红细胞和血小板计数区域，每个中方格用单线分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。

　　根据1941年国际标准局(NBS)规定，大方格每边长度允许误差为±1%，即(1±0.01)mm，盖玻片与计数池间隙深度允许误差为±2%，即(0.1±0.002)mm。

　　要点：

　　盖玻片：是专用的玻璃盖片，要求表面平整光滑，两面平整度在0.002mm以内，盖玻片规格是24mm×20mm×0.6mm。

　　要点：

　　静置：室温下平放3～5min，待细胞下沉后于显微镜下计数。

　　计数：先用低倍镜观察血细胞分布是否均匀，如严重分布不匀，应重新充池，然后用高倍镜计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。

　　红细胞在计数池中若分布不均，每个中方格间相差超过20个应重新充池，两次红细胞计数相差不得超过5%。

　　计数时需遵循一定方向逐格进行，以免重复或遗漏，对压线细胞采用数左不数右、数上不数下的原则。

　　要点：

　　红细胞稀释液：①Hayem液由NaCl(调节渗透压)、Na2S04(提高比密防止细胞粘连)、HgCl2(防腐)和蒸馏水组成，缺点是遇高球蛋白血症患者，由于蛋白质沉淀而使红细胞易凝集。②枸橼酸钠稀释液由枸橼酸钠(抗凝和维持渗透压)、甲醛(防腐和固定红细胞)、氯化钠(调节渗透压)和蒸馏水组成。③普通生理盐水或加1%甲醛生理盐水。