丙氨酸（天冬氨酸）和α-酮戊二酸在ALT（AST）作用下，生成丙酮酸（草酰乙酸）和谷氨酸，丙酮酸（草酰乙酸）在乳酸脱氢酶（苹果酸脱氢酶）作用下生成乳酸，同时NADH被氧化为NAD＋，NADH的最大吸收峰波长为340nm，在340nm处连续监测吸光度下降速率，可计算出ALT（AST）浓度。