荧光素结合到蛋白上的量的重要指标是荧光素与蛋白质的结合比率(F/P)。其计算方法是：FITC标记的荧光抗体稀释至A280nm约为1.0，分别测定A280nm和A495nm的值。F/P比值越大，表明抗体分子结合的荧光素越多，反之则结合越少。一般用于组织切片的荧光抗体染色以F/P=1.5为宜，用于活细胞染色以F/P=2.4为宜。