肝、脂肪组织及小肠是合成甘油三酯的主要场所，以肝的合成能力最强。肝细胞及脂肪组织主要以甘油二酯途径来合成甘油三酯，葡萄糖经糖酵解途径生成3-磷酸甘油，在脂酰转移酶的作用下，加上2分子脂酰CoA生成磷脂酸，磷脂酸在磷脂酸磷酸酶及转酰酶的作用下渐序生成甘油三酯。