根据胆红素是否直接与重氮试剂反应，分为直接胆红素和间接胆红素。直接胆红素是经过肝细胞加工后的胆红素，是n个胆红素分子与1~2个葡萄糖醛酸分子单独酯化的结构，易溶于水，可通过肾脏排泄，能直接与重氮试剂反应。间接胆红素是红细胞破坏后形成的胆红素，在循环中主要与白蛋白结间接胆红素不能与重氮试剂直接反应，必须有加速剂的参与，如甲醇、咖啡因等试剂才能反应。