脑膜炎奈瑟菌专性需氧，营养要求高。最常用的培养基是巧克力色培养基，即将血液加热80℃后制成的血琼脂培养基。初次分离培养时，还需提供5%～10%的CO2气体。一般培养48小时后，脑膜炎奈瑟菌在培养基上形成圆形隆起、表面有光泽、透明或半透明、直径约1mm～5mm的露滴样粘液型菌落。无色素形成。血平板上无溶血现象。