破伤风的病原菌为破伤风梭菌，该细菌在伤口局部繁殖，分泌大量外毒素进入血液循环而致病，而细菌不进入血液循环，故血细菌培养为阴性。破伤风梭菌为厌氧菌，伤口分泌物普通细菌培养难以发现该菌。破伤风患者脑脊液检查常无异常发现。活组织检查为气性坏疽的诊断方法。破伤风的临床症状比较典型，其确诊依据主要是临床表现。